国际肝病 发表时间:2026/4/25 21:49:13 浏览量:513
任锋教授团队在APASL 2026大会现场
研究一: DDX3X-CD36通路介导肝脏脂质积累增强小鼠肝再生能力关键作用研究
肝脏独特的再生能力对肝切除术后恢复及多种肝脏疾病的治疗至关重要。肝细胞内脂质积聚已被认为是肝脏再生过程中的关键因素,但内在机制尚不明确。本研究旨在阐明DDX3X在肝脏再生过程中介导脂质积聚的作用机制。
收集肝切除术后不同时间点患者的血清样本。通过实施2/3部分肝切除术(PH)建立C57BL/6小鼠肝脏再生模型。利用CRISPR/Cas9/Cre-LoxP技术构建肝细胞特异性DDX3X敲除(DDX3XΔhep)小鼠,以探究DDX3X在肝脏再生中的关键作用。通过高通量RNA测序解析DDX3XΔhep小鼠在肝脏再生过程中的下游信号通路。采用油红O染色观察肝脏脂质积聚情况,并运用qPCR和Western blotting分别检测目标基因及蛋白的表达水平。
接受PH治疗的患者血清DDX3X水平呈进行性下降。在小鼠肝脏再生模型中,DDX3X表达逐渐降低。此外,DDX3XΔhep小鼠相较于对照组表现出显著增强的再生能力,同时肝脏脂质水平明显上升。RNA测序显示,DDX3XΔhep小鼠在肝脏再生过程中脂肪酸摄取能力增强。值得注意的是,敲低关键脂肪酸受体CD36可显著减少DDX3XΔhep小鼠肝细胞脂质积聚,并阻碍其肝脏再生进程。
在肝脏再生过程中,肝细胞DDX3X缺失通过调控CD36促进肝脏脂质积聚,进而加速肝细胞增殖。本研究为理解肝脏再生的机制提供了新视角,并为促进患者术后恢复提供了潜在干预靶点。
研究二:基于CRISPR技术“一锅法”反应体系靶向戊型肝炎病毒RNA实现即时检测(POCT)
戊型肝炎病毒(HEV)对公共卫生及动物源性食品安全构成严重威胁,亟需建立快速、灵敏且操作便捷的检测方法。本研究旨在开发一种适用于资源有限环境下的即时检测(POCT)技术,即基于CRISPR“一锅法”实现HEV RNA的高效检测。
研究建立并优化了将CRISPR/Cas13a与RT-PCR及等温扩增(RT-RAA)相结合的HEV RNA检测体系,并通过包含154份HEV感染患者样本和74份感染动物样本的大规模队列进行了应用验证。
结果显示,成功建立并验证了适用于HEV基因型1、3、4的RT-PCR/RT-RAA联合CRISPR/Cas13a检测体系,检测限低至1 copy/μL,特异性达100%。在临床及动物样本验证中,以微滴式数字PCR为金标准,RT-qPCR、RT-PCR-CRISPR和RT-RAA-CRISPR对患者样本的阳性检出率分别为70.8%、98.6%和79.2%;对动物样本的阳性检出率分别为75.8%、95.2%和87.1%,两种CRISPR方法的检出率均优于RT‑qPCR。在此基础上,研究整合了样本快速裂解、试剂冻干及“一锅法”装置,构建了检测限为102 copies/μL的一体化检测体系。经5分钟快速裂解处理后的血清及粪便样本,总检测时间缩短至35分钟,操作简便、污染风险低,可满足现场筛查需求。
综上所述,本研究成功开发了一种基于CRISPR/Cas13a的HEV RNA“一锅法”检测技术,实现了“样本进,结果出”的POCT检测目标,最大程度发挥了POCT的应用潜力,为HEV感染的快速检测与动态监测提供了有价值的工具。
(来源:《国际肝病》编辑部)
声明:本文仅供医疗卫生专业人士了解最新医药资讯参考使用,不代表本平台观点。该信息不能以任何方式取代专业的医疗指导,也不应被视为诊疗建议,如果该信息被用于资讯以外的目的,本站及作者不承担相关责任。